引言：复发难题，迎来破局者
异基因造血干细胞移植（alloHSCT）后，恶性肿瘤复发是横亘在患者和医生面前的一道难关。供体淋巴细胞输注（DLI）虽能尝试“补救”，但应答率低，还容易引爆移植物抗宿主病（GvHD）这颗“地雷”。
传统CAR-T细胞在缺乏清淋化疗（lymphodepletion）时，往往显得“力不从心”——扩增慢、持久性差，像一支弹药不足的军队。
但有一类T细胞，堪称免疫细胞中的“干细胞”——干细胞记忆T细胞（TSCM）。它们能自我更新、多向分化、长期存活，且抗肿瘤活性极强，是过继免疫疗法梦寐以求的“种子选手”。
Cell重磅临床：头对头PK，TSCM完胜
2026年6月11日，国际顶刊《Cell》发表了一项由Luca Gattinoni、James N. Kochenderfer等团队主导的I期临床研究（NCT01087294）。
这是全球首个在人体内直接比较“干细胞记忆CAR-T（CAR TSCM）”与“传统CAR-T（Std）” 的临床试验。
结果掷地有声：CAR TSCM在疗效、安全性和持久性上全面优于传统CAR-T。
怎么做的？工艺差别决定成败
研究共入组31例患者（标准组20例，TSCM组11例）。
标准组：用抗CD3/IL-2激活外周血PBMC，产物是CD4+/CD8+混合的“杂牌军”，效应细胞占主导。
TSCM组：从纯化的初始CD8+ T细胞出发，在IL-7、IL-21 + GSK-3β抑制剂体系中培养，最终获得纯度超过98%的CD8+ TSCM（Figure 1.）。
更重要的是：所有患者均未接受清淋化疗，直接输注体外仅培养7天的CAR-T细胞——这更考验产品的“内在战斗力”。
▲Figure 1. CAR TSCM products exhibit greater phenotypic uniformity than standard CAR T cells
疗效：低剂量，高响应，长生存
TSCM组产物中TSCM比例高达78.4%（中位数），而标准组仅8.4%。
在低剂量（<3×10⁸细胞）下，TSCM组完全缓解率（CR）达45%（5/11），显著高于标准组的10%（1/10）。TSCM组有4名患者无事件生存期（EFS）超过24个月。
尽管输注剂量更低（中位6.6×10⁷ vs 标准组2.9×10⁸），TSCM组体内峰值扩增却是标准组的4~5倍（30.4 vs 6.7 CAR-T细胞/μL），且曲线下面积（AUC）更高（Figure 2.）——说明它们不仅扩增多，还“待得更久”。
▲Figure 2. Enhanced expansion and persistence of CAR TSCM cells drive superior responses at lower doses
安全性：告别细胞因子风暴
CRS（细胞因子释放综合征）是CAR-T的“老大难”。标准组中28.6%出现3~4级严重CRS，而TSCM组无一例3-4级CRS事件发生（仅1例3级CRS），且所有患者均未发生GvHD。
CRS的严重程度与CAR T细胞的扩增程度相关，在两组受试者上观察到，体内CAR-T达到峰值扩增时，接受CAR TSCM的患者CRS等级更低（G1-2），而标准组则已达到G3-G4。
在CAR-T输注后，两组受试者均观察到发热；尽管两组发热温度相似，但标准组炎症反应更严重，细胞因子谱分析显示，标准组的CRS与IL-6水平升高相关；而TSCM组主要表现为输注后第二周（与扩增峰值一致）IFN-γ的峰值升高。
机制上，TSCM产物几乎不含驱动IL-6释放的CD4+ T细胞，主要分泌IFN-γ而非IL-6——这就解释了为何扩增更强，但炎症反应反而更温和。
持久性秘密：克隆演替，自我更新
标准CAR-T扩增“快而短”，峰值在第1周，随后快速衰退。
而CAR TSCM表现为“延迟扩增”，峰值在第2周，之后通过“克隆演替”——早期克隆收缩，新克隆波次接力出现，持续重建TSCM“干细胞池”——实现长期存续。
这种模式，与造血干细胞的重建逻辑如出一辙。
体外培养，如何“锁住”TSCM的干性，实现TSCM细胞有效扩增？
上述文章的TSCM细胞亚群研究为解决当前CAR-T疗法面临的体内扩增不足与安全性难题提供了关键的科学依据，那么在体外培养时，如何获得高质量的TSCM细胞，细胞原材料、培养工艺、和培养基缺一不可。
在无血清培养体系下，如何在无血清培养体系下，收获高质量的CAR-T或CAR TSCM细胞，以下四步是关键：
① 起始细胞纯化
使用Fab-Streptamer™技术从PBMCs中分选CD8+CD62L+CD45RA+初始/早期记忆T细胞，排除已分化的效应细胞。
② 生理性激活
采用CD3/CD28磁珠刺激，比可溶性anti-CD3更接近体内T细胞激活方式，有助于维持干性。
③ 精准细胞因子组合
IL-7：促进分化、维持干性、支持存活；IL-21：限制效应T细胞成熟，抑制终末分化；TWS119（GSK-3β抑制剂）：激活Wnt/β-catenin通路，阻止效应分化，促生CD8+记忆干细胞。
④ 缩短培养时间
体外培养控制在6~7天，减少过度刺激导致的耗竭和终末分化。（Figure 3）
▲ Figure 3. 分选工艺和细胞因子对T细胞干性的影响及不同培养时间下T细胞的干性表现
好培养基，事半功倍：OptiVitro®无血清培养基
不同无血清培养基对T细胞扩增和未分化状态的维持能力差异巨大。
OptiVitro® T细胞无血清培养基，具备无血清、无异种成分双认证，且拥有DMF备案号（038863），满足申报合规要求，支持临床申报和商业化。
实测数据（以外周血T细胞作为原材料）：
① 10天累计扩增400倍
② 细胞活率及CD3表达均≥90%
③ 培养第6天，T细胞干性（Tn+Tscm，即CD45RA+CCR7+）比例保持约60%
这意味着，在保证数量的同时，依然锁住了“质量”。
▲ Figure 4. OptiVitro对T细胞活率、表型、扩增倍数及干性的培养表现优异
依科赛T细胞无血清培养基核心优势
1.已助力多家客户FDA 与CDE 中美IND申报成功获批， 覆盖了CAR-T、TCR-T、UCAR-T、TIL等技术管线。
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3.完全自主开发，供货稳定，GMP级别，DMF备案（038863），支持临床申报和商业化。
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本文作者：依科赛研发科学家 周丹
现任依科赛研发二部研发副经理，长期专注于免疫细胞治疗领域，核心专长为CAR-T、UCAR-T细胞疗法的全流程工艺开发。在T细胞培养技术方面积淀深厚，主导无血清培养体系下的工艺优化，系统攻克了T细胞扩增倍数提升、慢病毒高效转导、体外肿瘤杀伤及干性维持等关键技术难题，为免疫细胞治疗产品的产业化应用提供了坚实的技术支撑与工艺保障。
内容: 依科赛研发科学家周丹
审核：依科赛研发二部、市场部
编辑排版：品牌