一般情况下,建议使用裸鼠(BALB/c-nu/nu),BALB/c-nu/nu没有胸腺等免疫器官,对肿瘤细胞没有免疫作用,易于成瘤。
肿瘤块先缩小,后变大是比较常见的,可能是炎症反应造成的。一方面,基质胶在早期将肿瘤固定在皮下后,由于注射量极少,小鼠首先会吸收基质胶,之后可能有一部分肿瘤细胞被小鼠自身吸收,您可以继续观察2周。另一方面,您还需要考虑细胞本身成瘤性、细胞活力以及细胞注射量等因素,如果可能是这方面原因造成的,需要再次进行验证。
是的,多点位皮下注射的肿瘤可能会相互影响。
并非所有的肿瘤都能够有均一形态规则,肿瘤体积差距很大可能与小鼠周龄及接种细胞量不一致导致,建议使用周龄较小的裸鼠,细胞接种时对细胞悬液进行充分重悬。
您可以在实验前一天使用无血清培养基饥饿细胞,第二天成管效果会更好,也要注意细胞的密度
成管时间主要取决于培养基中血管生成因子的浓度,ECM完全培养基或肿瘤条件培养基中血管生成因子较丰富,容易成管,我们推荐使用这类培养基进行操作。
成管时间与细胞状态密切相关。细胞状态好时,2-3小时开始成管,细胞状态较差时,可能18-24h成管;如果使用原代内皮细胞而非永生化细胞,开始成管的时间会延迟几个小时。我们建议您首次实验时,每4个小时观察一次。
无酚红基质胶没有颜色干扰,更适用于需要染色分析的相关应用;含酚红基质胶中的酚红可以作为pH指示剂,被稀释于大体积培养液后,产品本身的指示作用强度降低。另外,酚红有类似雌激素的效果,在对激素敏感的相关研究中,建议使用无酚红基质胶。
标准浓度和高浓度均为区间定义,在4℃条件下,二者物理性质上有显著区别。标准型基质胶浓度在8-13mg/ml,高浓度基质胶浓度在16-26mg/ml。标准型基质胶凝胶时间约为20-30分钟,高浓度基质胶凝胶时间约为3分钟。与标准型基质胶相比,高浓度基质胶显著较为粘稠。
低因子基质胶产线是在标准型基质胶的基础上进行减生长因子处理后产生的,主要区别在于低因子基质胶中痕量IGF-1、VEGF、TGF-β、EGF、bFGF等生长因子的含量均少于标准型基质胶。基质胶中的细胞因子,容易引起细胞的不定向分化,甚至凋亡。低因子基质胶常用于在类器官培养等需要精准分化控制细胞培养场景。