293细胞做瞬转蛋白表达，5-7天后一般可以得到100mg-1000mg/L。CHO细胞长期用于稳转蛋白表达，有的可以做到10g/L，开发的工艺和相关的培养基开发都比较成熟，所以表达量都要比293高。
我们这里一般是用HPLC过Protein A 柱子来检测，或者用R8蛋白质分析系统通过检测结合速率来确定蛋白产量。客户如果用BCA来测也可以，需要注意去除死亡的宿主蛋白。样品的处理方法为10000rpm离心5min后，用0.22μm过滤后，如果是BCA方法需要提前纯化去除杂蛋白再检测。这三种方法因为我们这里没有标准品，不好说哪个更准。
不会，293细胞属于永生细胞系，可以一直传代，一般在20-30代以内没有太大问题。
明确是不含有细胞周期阻断成分的，比如丁酸钠，VPA（丙戊酸钠）之类的
不可以培养贴壁的293细胞，只能进行无血清悬浮驯化成悬浮293细胞，贴壁293 的病毒生产可以推进病毒生产无血清培养基（换液培养基），降低下游纯化压力
正在从复苏密度，培养基种类，筛选压力，摇床转速，抗剪切添加物等方面协同客户排查原因
293瞬转中添加的葡萄糖为3g/L，所以推荐客户配制300g/kg的葡萄糖溶液，每次添加培养体积的1%即可； 关于高浓度的葡萄糖配制时，不要用热水，会有一定的碳化现象，配置时，使用磁力搅拌器，一点点加入，溶解后再继续添加，配置完，使用0.22um滤器过滤除菌。不要用高压灭菌，会碳化。配置全程注意烧杯以及水的内毒控制。
HE01中含有EDTA，如果客户的蛋白是His标签，镍柱纯化，就会冲柱，影响收率
补料可以隔天补料，每次5%，葡萄糖就根据体系内葡萄糖浓度，补齐到6g/L，这个A1补料糖浓度为65g/L，计算的时候需要减去
除去葡萄糖后，大约是80g/L；渗透压稀释5倍后为260 mOsm/kg
