可用基础培养基+添加组分，添加IL-2，初期用无血清体系替换血清体系，需要加浓度比较高的IL-2，建议1000IU/mL，传3代后，可降低IL-2浓度至200IU/mL左右

不需要，对于PBMC，TC/非TC效果类似，对于脐血细胞，要使用非TC处理的培养瓶，脐血细胞贴壁性较强。

可以，滋养层细胞可替代细胞因子I和II, 对于某些滋养层细胞，可加IL-2使用，某些滋养层细胞不能单纯加IL-2，仍然需要其他细胞因子，我们有扩增基础试剂盒可以使用。

建议4℃过夜包被，测试过4℃过夜包被效果更好，如果实验安排不定，强烈建议当天37°四小时包被，不建议时间过长过短。注意接种的时候不要对着包被的底部吹打。

NK细胞扩增基础试剂盒P01（NE000-N032）含有基础培养基、添加组分和细胞因子III，支持细胞扩增，与NK细胞扩增试剂盒P01（NE000-N022）配合使用。

基础培养基+添加组分，一般室温放置一个月不影响效能。但是额外添加蛋白因子后，不适合长期放于室温。

一般建议Donor的起始NK比例在10%左右会比较好，在5-15%的范围内都可以正常培养，如果起始比例低于5%，那么后续的NK阳性率和增殖都会比较难，如果比例到15%甚至更高，那么这次培养的比例和增殖都会比较理想。

培养到D14天之后收获，一般是将细胞培养袋中的细胞进行离心，然后用PBS清洗两遍，最后用含2%的人血白蛋白的生理盐水进行重悬。