1）依科赛培养基不含抗结团剂； 2）使用合适的转速：125mL 摇瓶内，培养体系为 20-30mL，推荐转速为 95 rpm（50 mm 转径摇床）或 125 rpm（19mm 转径摇床） 3）20g转速，离心3min，去除结团细胞，取上清继续培养 4）注意转染前不能加抗结团剂，转染后24h可以添加 5）肉眼可见比较大的细胞团、或活率降到70%以下，需要试用抗结团剂。

1）新复苏的细胞至少需要传代 4 次、且活率达到 90%以上再进行转染，转染前细胞密度为 2-3×106cells/mL（根据实验的转染密度，提前一天接种细胞）。将质粒、转染试剂分别加入无菌 PBS（或转染专用稀释液）中稀释，室温静置 5 分钟。将转染试剂稀释液缓慢加入到质粒稀释液中，混匀，室温孵育 10-15分钟。将质粒-转染试剂混合物加入悬浮 293 细胞培养液中，放入培养箱中培养。转染后无需换液，48-72 小时后可进行转染效率检测、收获蛋白或病毒等操作。 2）本培养基产品支持 PEI、脂质体等转染试剂。如细胞密度为 2×106cells/mL，建议添加质粒量为 1µg/mL；如细胞密度为 3×106cells/mL，建议添加质粒量为 1.5µg/mL。如使用 PEI 转染试剂，PEI 与质粒的质量比例建议为 3:1。

1）支持 PEI、脂质体等转染试剂，质粒、转染试剂的稀释推荐用Opti-MEM 培养基（GIBCO 品牌）或无菌 PBS或150mM的氯化钠溶液。混合后的转染试剂和质粒加入到293培养体系中，体积占比一般不会超过10%。 2）影响转染的因素：转染试剂来源、效能；质粒的设计质粒的质量转染试剂与质粒的质量比；细胞密度；转染工艺增强剂；细胞密度；转染工艺；增强剂；收取病毒的时间 3）选择活率高、指数期的细胞 4) 转染前，细胞需要提前接种并培养一天，根据平时细胞生长速率控制好接种密度，尽量避免在转染前再通过离心或稀释的方法调整密度

培养瓶培养建议最高4-5 E6/ml； 袋子建议最高3-4 E6/ml(takara袋子，密度高影响生长，不同培养袋可能表现不同）

可以，加1000IU/mL IL-2使用，搭配NK无血清培养基NH01。

不需要额外添加

本产品支持T细胞重激活培养，配合OptiVitro冻液使用更佳；

TE000-N022/TE000-N032适合培养Jurkat细胞，不需要额外添加血清

TE07是我们在032基础上，在转导和后期增殖方面做了优化的培养基，转导这块，如果客户看重慢病毒转导，则推荐TE07，如果客户是电转，则推荐T032

在配置培养基的时候，需要将各组分平衡到室温，其实包括分离PBMC的时候，也需要各组分平衡到室温，前者是因为培养基之间有温差，有可能出现絮状物或者析出物，后者则是因为密度分离法，对于温度是比较敏感的。