包被后的培养板最好立即使用,如不立即使用,可加入培养基后在37℃存放一周。
诱导分化并不取决于基质胶,这是由培养基定向分化完成的。依科赛干细胞基质胶(货号:RF010-N011/RF010-N012)可以维持干细胞培养,保持干性,有利于后续的定向分化。
有。下层培养液和小室间常会有气泡产生,一旦产生气泡,下层培养液的趋化作用将会减弱,可以通过将小室提起,去除气泡,再将小室放进培养板中。
当基质胶被稀释到小于3mg/mL时,无法清晰地观察到凝胶现象,只要在37℃环境进行孵育,基质胶会在底层形成薄层凝胶。
根据测试数量决定。对于24孔板的transwell小室,我们建议使用将标准浓度基质胶进行1:8稀释后,以60μL稀释液进行铺胶。
由于温度与瓶内微量二氧化碳作用,含酚红基质胶中的酚红会随pH变化而产生颜色变化,即使完全溶解后仍呈现黄色,在实验过程中,经pH平衡后,酚红颜色会恢复,不影响产品性能。无酚红基质胶的颜色不会有明显的变化。
基质胶的蛋白浓度大概在8-13 mg/mL范围内,多能干细胞培养一般采用薄层包被方法,“建议浓度不低于0.1 mg/mL”,使用推荐一般是根据浓度换算之后按比例稀释或者简单一点1:100稀释使用。我们这边提供的测试数据基本上是按稀释100倍做的,推荐也是这样;具体客户按多大比例稀释,按照客户自己的实验和测试需求决定。
可以,但尽量不要。1.分装可以避免产品污染;2.虽然反复冻融依旧能保持良好性能,但分装可以最大程度保证实验的一致性。我们建议客户首次融化后按照单次使用量进行分装,若无法预判用量,请尽量减少基质胶的冻融次数。
由于冰箱温度经常不准确,尤其是旧冰箱,冰箱门打开之后,温度容易疾速上升,甚至超过10℃。因此,大多数情况下是因为冰箱温度过高所致,所以建议基质胶放置于碎冰上,然后放在4℃冰箱中进行化冻。 如果您的基质胶已经凝固,首先,您需要确认产品的货号、浓度;其次,您需要查看融化产品所使用的冰箱温度,最后,确认在冰箱的放置时间。 可以采取如下解决方案: (1)若为标准浓度产品,冰箱温度为6-10℃,或位于开关门处一天左右,可以转移产品至0±1℃环境解聚合4h左右,建议每2h观察一次,产品可以恢复液态。 (2)若为高浓度产品,冰箱温度为4-8℃,或位于开关门处一天左右,可以转移产品至0±1℃环境解聚合,建议每2h观察一次,产品可以恢复液态,需要较长的时间,每批产品浓度有所差异,无法提供具体时间。 产品从凝固状态恢复液态后,请立即使用或分装冷冻贮存,下次使用前插在碎冰中进行融化,避免再次出现类似情况。
高浓度基质胶的解冻时间略长于标准浓度基质胶,以标准型基质胶为例进行说明。分两种情况,若为全新未拆封的商品,冷冻状态的基质胶可以在操作前一天埋藏于碎冰中,再转移入2-8℃冷藏室,次日即可使用,也可以在操作前4h左右暴露于4℃环境解冻,立即使用;若为已经分装好的产品(以500μL为例),冷冻的基质胶在操作前30min左右暴露于4℃环境解冻,即可使用。