血清解冻后可能出现肉眼可见絮状沉淀物,属正常现象,不影响血清质量。发生沉淀的主要原因是血清中白蛋白和脂蛋白在溶解过程中出现微量蛋白变性而引起沉淀聚集析出;作为凝血蛋白之一的血纤维蛋白在血清解冻后也会存在于血清中,也是造成血清沉淀的因素之一。按照推荐方法解冻可以有效减少沉淀产生。对于絮状沉淀物如必须处理,请于500×g离心5-10 min,取上清即可正常使用;不处理直接使用也不会影响血清效果。
细胞形态异常,需要综合关注细胞代次、传代操作、培养基和血清等诸多因素。传代次数过多会导致细胞生长状态明显变差,传代过晚也会因接触抑制造成这一现象。且细胞对血清具有一定适应性,在使用某个批次血清进行连续传代培养后,更换新批次血清时,会因两批血清中各类物质含量的差异导致细胞生长状态受到影响。但只要细胞可以增殖,这些情况都是有机会调整好的。与此同时也要关注基础培养基和传代操作等方面是否存在一定影响。值得关注的是,不同批次血清可能对特定细胞匹配性不同,因此推荐采购前进行试用。
依科赛血清生产工艺采用国际最先进的三级0.1μM过滤工艺,分装环节拥有超洁净分装环境以确保无菌,质检方面均经过原产地和国内的双重质检,保证每个批次血清的细菌、真菌和支原体等微生物检测均为阴性,因此依科赛血清在生产、分装和质检等各个环节都严格避免了微生物污染的发生,不会出现血清本身存在微生物污染的情况,依科赛血清的优异品质会为您的细胞培养实验保驾护航。 细胞培养过程中的微生物污染一般多见于操作阶段,例如操作过程中没有严格区分无菌区域和非无菌区域、分装血清冻存时因体积过大顶开盖子、冻存管在融化后打开前没有在管盖周围进行充分消毒等,都会引起微生物污染,因此在血清使用过程中应重视全程无菌操作。如需排查血清是否存在污染,可取少量血清进行无菌检测。 确定血清存在微生物污染后可尝试使用5-10倍浓度的青链霉素双抗冲击培养24-48h;真菌污染的细胞无法抢救,应立即将细胞瓶进行高压灭菌处理,并彻底消毒培养箱;支原体污染可考虑更换早期代次细胞,或使用商品化支原体去除试剂。
不同批次血清颜色可能略有差异,从黄褐色到浅红褐色均属正常情况,对血清质量没有影响。颜色差异的主要原因是血清中含有微量血红蛋白,与血清采集和离心等工艺相关。依科赛生物血清质检标准均选择中国药典、美国药典和欧洲药典中最严苛要求制定,即按照中国药典规定血红蛋白含量应≤200 mg/L,依科赛血清所有批次在出厂前均经过严格检测,确保符合各项要求。
取出冷冻血清于2-8 ℃冷藏柜中解冻1-2天;或至少提前一天将血清放置于2-8 ℃冷藏柜中,待血清大部分解冻后取出置于室温,每隔一小时轻轻晃动直至完全解冻,完全解冻后请立即使用。严禁将血清置于37℃长时间孵育解冻。通常情况下一瓶血清会分多次使用,完全解冻之后请立即分装。我们推荐使用50mL离心管对血清进行分装,分装量每管不超过40ml,旋盖处使用封口膜密封,分装后的血清放回冰箱冷冻保存,按需取用。
依科赛生物ExCell Bio的所有血清都在冷冻状态下通过冷链运输,正常情况下收货时应仍处冷冻状态。如出现部分解冻情况,血清仍然可以正常使用,但建议您先在2-8 ℃冷藏柜中充分解冻,解冻过程中每隔一小时进行温和摇晃使之解冻均匀,待完全解冻后再移至-20℃条件下储存,尽量避免化冻不完全时又进行冷冻。
血清到货后请检查内外包装,确认没有问题后请正置存放于-20 ℃的非自动除霜恒温冰箱中。无论是整瓶还是分装后的血清,解冻后请勿长时间放置在室温或2-8 ℃环境中,以免造成血清质量下降。
①走私血清缺乏检验检疫监管,冷链运输无法保障,严重影响血清批内和批间稳定性,实验数据结果不可控;
②正规的血清来源于中华人民共和国海关总署允许进口的非疫区国家,而很多走私的血清往往来自发生过疫情的国家。未经检疫的血液制品中可能携带传染性物质,一旦流入境内,可能会对试者和研究人员的生命健康造成威胁。
FBS中的絮状物可能由很多种原因造成,其中最常见的沉淀主要成分是纤维蛋白和脂蛋白,不会影响血清品质,沉淀若需去除,视沉淀大小500-1000×g,离心5-10min去除,也可不做处理。