依科赛生物科技（太仓）有限公司

✓ 无血清，不含异源动物成分，化学成分限定培养基；
✓ 支持多种悬浮293细胞的快速扩增和高密度生长；
✓ 维持多种悬浮293细胞较长周期的高活率生长；
✓ 支持悬浮体系下的高效转染、病毒（慢病毒、腺相关病毒等）包装、蛋白表达；
✓ 按照GMP标准生产和管理，支持IND和商业化。

适用于悬浮293细胞的快速扩增、高密度悬浮生长以及转染、病毒包装、蛋白表达等。
应用于细胞疗法、基因疗法开发等。

OptiVitro® 293细胞无血清培养基-常见问题: 1. 是否需要添加谷氨酰胺？
需要额外添加终浓度为 6mM 的谷氨酰胺。由于谷氨酰胺易降解，可每次使用培养基时加入谷氨酰胺，或者分装部分培养基添加谷氨酰胺后一周内使用。
2. 不同体系培养基适应和驯化？
1)需要在培养过程中额外添加终浓度为6 mM的谷氨酰胺；加入谷氨酰胺（Gln）后需一周内使用；
2)不可反复放置于37℃预热。如需37℃预热，可于每次使用前分出所需体积，放于37℃预热，剩余体积及时放回2-8℃冰箱保存；
3)如果细胞原来在其他品牌培养基里培养，可直接用本培养基产品传代培养，传代 3 次（9-10 天）后细胞可适应本培养基产品，活率、细胞密度稳定，可进行后续实验。
4)如果原悬浮293细胞是用其他品牌培养基培养后冻存的，请用冻存时使用的细胞培养基来复苏细胞，传一代后换成本培养基产品，再传代 3 次、细胞状态稳定，可进行后续实验。使用本培养基产品培养后冻存的细胞，则可以使用本培养基产品复苏
3. 如何进行转染？
新复苏的细胞至少需要传代 4 次、且活率达到 90%以上再进行转染，转染前根据需要调整细胞密度为 2-3×106cells/mL。将质粒、转染试剂分别加入无菌 PBS（或转染专用稀释液）中稀释，室温静置 5 分钟。将转染试剂稀释液缓慢加入到质粒稀释液中，混匀，室温孵育 10-20 分钟。将质粒-转染试剂混合物加入悬浮 293 细胞培养液中，放入培养箱中培养。转染后无需换液，48-72 小时后可进行转染效率检测、收获蛋白或病毒等操作。
本培养基产品支持 PEI、脂质体等转染试剂。如细胞密度为 2×106cells/mL，建议添加质粒量为 1µg/mL；如细胞密度为 3×106cells/mL，建议添加质粒量为 1.5µg/mL。如使用 PEI 转染试剂，PEI 与质粒的质量比例建议为 3:1。
4. 如何提高转染？
支持 PEI、脂质体等转染试剂，质粒、转染试剂的稀释推荐用Opti-MEM 培养基（GIBCO 品牌）或无菌 PBS。混合后的转染试剂和质粒加入到293培养体系中，体积占比一般不会超过10%。
5. 如何测定病毒滴度？
1）QPCR法：使用根据慢病毒DNA设计的引物，用慢病毒裂解物为底物进行QPCR分析，根据标准曲线确定慢病毒滴度。
优点：定量、精确；缺点：非活性计数。
2）稀释法：使用稀释的表达荧光蛋白的慢病毒感染细胞，尽量使1个细胞只接受1个慢病毒感染，72小时后根据荧光细胞数量计算慢病毒滴度。
优点：计算慢病毒活性；缺点：只能用于表达荧光蛋白的慢病毒。
3）流式分析检测：使用表达荧光蛋白的慢病毒感染细胞，使用流式细胞仪分析荧光细胞比例。
优点：快捷方便；缺点：无法定量。

货号	产品名称	规格
HE000-N012	293细胞无血清培养基HE01 （瓶装）	1000 mL
HE000-N011	293细胞无血清培养基HE01 （瓶装）	500 mL
HE000-N021	293 细胞无血清培养基 HE01 （粉体）	1 L
HE000-N022	293 细胞无血清培养基 HE01 （粉体）	10 L
HE000-N023	293 细胞无血清培养基 HE01 （粉体）	50 L
HE000-N024	293 细胞无血清培养基 HE01 （粉体）	100 L

OptiVitro® 293细胞无血清培养基HE01（HE000-N012）

OptiVitro® 293细胞无血清培养基HE01（HE000-N012）

概述性能相关产品应用图片数据及文件文献 Q&A COA

OptiVitro® 293细胞无血清培养基HE01（HE000-N012）

OptiVitro® 293细胞无血清培养基HE01（HE000-N012）

概述 性能 相关产品 应用 图片 数据及文件 文献 Q&A COA

概述性能相关产品应用图片数据及文件文献 Q&A COA