产品概述
内皮抑素对内皮细胞的抗生长和抗迁移作用是众所周知的。因此,它作为血管生成抑制剂降低维持肿瘤生长的血液供给的潜在应用备受关注。内皮抑素最开始被认为是从鼠科动物的血管内皮瘤(EOMA)细胞中识别的胶原蛋白XVIII的20 kDa 蛋白水解片段。人胶原蛋白XVIII由包含至少两个变体的N-端区域,中心三螺旋区域和C-端非成胶区域(NC1)组成,而内皮抑素来自于C-端非成胶区域。人内皮抑素从非成胶(NC1)区域释放的过程还不甚清楚。然而,组织蛋白酶L(Cathepsin L)和弹性蛋白酶(Elastase)被认为是在血管内皮瘤(EOMA)细胞中负责其产生的蛋白酶。健康捐献者血清内皮抑素的平均浓度是变化的,大约是20ng/ml。
产品原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人Endostatin单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的Endostatin会与单抗结合,游离的成分被洗去形成免疫复合物;加入生物素化的抗人Endostatin抗体,生物素化抗人Endostatin抗体与酶标板上结合的标准品或样本中的Endostatin结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,亲合素与生物素特异性结合,游离的成分被洗去。加入显色底物(显色剂),若反应孔中有Endostatin,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂变蓝,加终止液变黄。在450nm处测OD值, Endostatin浓度与OD450值之间呈正相关,可通过绘制标准曲线求出标本中Endostatin浓度。
产品性能
1. 灵敏度:最小可测人Endostatin达30pg/ml 。
2. 重复性:板内、板间变异系数均<10%。
产品组分及储存条件
名称
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96 Tests
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48 Tests
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保存条件
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1. 抗体包被板条 (Microwell Plate)
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8×12
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8×6
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2-8℃
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2.标准品 (Standard)
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2 支(冻干)
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1 支(冻干)
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2-8℃
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3.浓缩生物素化抗体 100× (Biotin-Conjugate)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃
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4.浓缩酶结合物 100× (Streptavidin-HRP)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃(避光)
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5.试剂稀释液 (Assay Diluent)
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4 瓶(25ml/瓶)
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2 瓶(25ml/瓶)
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2-8℃
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6.浓缩洗涤液 20× (Wash Buffer Concentrate)
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1 瓶 (30ml/瓶)
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1 瓶(30ml/瓶)
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2-8℃
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7.显色剂 (Substrate Solution)
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1 瓶(12ml/瓶 )
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1 瓶(6ml/瓶)
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2-8℃(避光)
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8.终止液 (Stop Solution)
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1 瓶(12ml/瓶)
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1 瓶(12ml/瓶)
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2-8℃
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9.封板胶纸
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3 张
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2 张
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10.说明书
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1 份
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1 份
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试验所需自备仪器和试剂:
1. 酶标仪(450nm检测波长滤光片,570nm或630nm校正波长滤光片)。
2. 高精度加液器及一次性吸头:0.5-10μl,2-20μl,20-200μl,200-1000μl。
3. 37℃恒温箱、蒸馏水或去离子水、坐标纸。
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