原理：PCR法检测有无支原体污染

支原体（直径0.2-0.8微米）污染可能来自培养基，血清或实验操作者，会影响细胞生长率，细胞形态，基因表达，细胞代谢和细胞活力，影响MTT实验结果和影响基因表达。支原体感染不易察觉，因此对培养细胞定期进行支原体检测非常重要。一般来说每1至3个月就应进行一次支原体检测。

操作极其简单，整个操作流程只需3次离心，整个操作时间不超过一个小时；浓缩效率极高：15cm培养板能够获得1 x106~1x107 ifu的病毒；无任何毒害作用：不会积累细胞残片，避免了毒性和免疫反应无需超速离心机：降低了昂贵的机器成本适合大体积浓缩：很好的解决了超速离心方法的容量限制冷冻保护：经得起反复冻融

基于聚合物沉降法，针对慢病毒的特性（粒径，等电点等）配制而成的最优浓缩体系。将其与含有病毒的细胞上清混匀（1V：4V），4°C 过夜，1500×g离心30min收集病毒

cfDNA在样品中的含量本身有一定的差异；对于样品本身，要注意其来源和储存条件，血浆、血清分离的时间避免过长，冻存后注意避免温度波动及反复冻融；在试剂盒使用过程中，建议操作人员尽量避免更换以减少操作误差导致的得率波动

血清、血浆均可；样品起始量根据不同产品在0.2-10mL之间；建议起始样品量不少于2mL

ELISA的测定结果可分为两种：定性测定和定量测定。前者只需确定阴性或阳性即可；后者则需要给具体的数值。在定量测定中，经常要将标准品所获得的吸光值进行标准曲线的绘制

读板时要保证酶标板清洁，同时也要注意酶标仪的波长是否已调至合适或所用滤光片是否正确。 通常，单波长读板的测定值一般是指以对显色具有最大吸收的波长如450nm或492nm进行比色测定；而双波长读板的测定值一般是敏感波长如450nm的吸光值与非敏感波长下如630nm的吸光值之差，可排除板内脏物的影响。同时，由于ELISA测定中单个空白孔的非特异吸收上有一定程度的不确定性，也就是说每次测定或同次测定空白孔位置的不同均有可能得到不同吸光度测定值，故而在ELISA测定比色时，最好是使用双波长比色

目前以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中，如以TMB为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以OPD为底物，则试剂盒提供OPD片剂或粉剂，临用前配制。显色剂配制后放置时间过长（肉眼可见浅蓝色的TMB时）要弃之不用。在加入底物开始显色反应前，最好是先检查一下底物溶液的有效性，即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中，观察是否有显色出现，如有，则说明底物已变质。 显色反应条件一般为37℃或室温反应15-30分钟。加终止液时，要避免气泡产生而引起的假阳性

为了确保ELISA测定的特异性，洗板可清除非特异性结合物质，减少背景信号，增加分析的信噪比。 手工洗板时，拍板要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离。使用半自动洗板时，应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出。为了达到较好的洗涤效果，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，即在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次。 以HRP作为标记酶的ELISA试剂盒中使用的洗板液一般为含0.05% Tween20的中性PBS，其中，吐温20的浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低实验的灵敏度